Caracterización química y estudio del efecto antiparasitario de especies de la flora nativa para tratar la enfermedad de Chagas

Abstract

La enfermedad de Chagas (EC), es endémica en 21 de 35 países de Latinoamérica y se extiende al resto del mundo. Es producida por el parásito Trypanosoma cruzi y representa una amenaza para la salud de 10-20 millones de personas. Para el tratamiento, benznidazol (Bzn) es la droga de elección disponible, pero produce numerosos efectos adversos y es poco eficaz en la fase crónica de la enfermedad. Existe una gran necesidad de encontrar nuevos compuestos contra T. cruzi que sustituyan las terapias actuales o reduzcan las dosis empleadas. Plantas y líquenes producen una variedad de metabolitos que son una fuente interesante de nuevas moléculas o compuestos, que podrían, reemplazar las terapias actuales para enfermedades infecciosas o crónicas. En este contexto, se evaluó la actividad anti-T. cruzi de productos naturales (extractos, fracciones y compuestos) obtenidos de Echinopsis terscheckii, Hippeastrum spp., Maytenus viscifolia, Seriphidium mendozanum y Usnea lethariiformis. En una primera etapa, se estudió el efecto sobre la proliferación y viabilidad de epimastigotes cepa Dm28c y se destacó el efecto tripanocida de S. mendozanum y el efecto tripanostático de Hippeastrum spp., M. viscifolia y U. lethariiformis. Además, los compuestos aislados tales como ácido úsnico, pristimerina, montanina y candimina presentaron una potente inhibición de la proliferación de epimastigotes, especialmente el alcaloide candimina evidenció intensa vacuolización, desorganización de estructuras del tipo-reservosomas y un significativo aumento en la actividad mitocondrial. En tripomastigotes y amastigotes (cepa Tulahuen- β-galactosidasa) y en células de mamíferos (Vero y HepG2), el extracto de H. escoipense y candimina, mostraron especificidad sobre T. cruzi, donde candimina mostró mayor actividad anti-T. cruzi y menor citotoxicidad que Bzn. Los ensayos de combinación de los alcaloides montanina, candimina y el extracto de H. híbrido con Bzn, propuestos para determinar diferentes interacciones (antagónica, sinérgica o aditiva), mostraron efecto sinérgico en la combinación de montanina y Bzn, con una reducción de la dosis de Bzn alrededor de 20 veces. Por otra parte, la combinación de candimina y Bzn mostró al menos una interacción sinérgica en cada estadío de T. cruzi, con efectos más marcados en amastigotes. Además, en todas las combinaciones evaluadas hubo una reducción de la dosis de Bzn. Estos resultados cobran mayor relevancia porque la combinación de candimina y Bzn resultó antagónica para las células Vero y HepG2, indicando una disminución de la citotoxicidad de ambos compuestos cuando actúan en conjunto, posicionando a candimina como un compuesto promisorio para el tratamiento de la EC. Finalmente, en el análisis químico mediante UHPLC-MS y GC-MS de los bulbos de Hippeastrum spp., se identificaron 12 alcaloides, licorina y montanina fueron los de mayor prevalencia. También se identificaron los alcaloides activos contra T. cruzi hippeastrina, licorina, montanina y pancracina. Por otra parte, en el liquen U. lethariiformis se identificaron 5 compuestos fenólicos, de los cuales ácido úsnico fue el más abundante. El conocimiento generado en este trabajo, constituye un aporte valioso y novedoso y sienta las bases para la continuidad de la temática, vinculadas a la búsqueda de nuevos compuestos bioactivos frente a Trypanosoma cruzi y profundizar sobre el estudio de los mecanismos de acción involucrados. Adicionalmente las metodologías y procesos aplicados para determinar la efectividad de la combinación de compuestos constituyen una herramienta útil, que además puede extrapolarse a otros productos naturales con potencialidad para disminuir las dosis y efectos adversos de Bzn.